Coriell Institute細胞的實驗和使用方法介紹

　　一、CoriellInstitute細胞實驗方法：

　　藥敏片的制備(bèi)：一般情況下，如無法獲取，可以自行制備(bèi)。首先定性濾紙，用内徑爲6mm的打孔器制備(bèi)好紙片，按每包100片包裝好，高壓滅菌，烘幹備(bèi)用。然後，将待檢藥物用蒸餾水按實際用量的10倍稀釋，充分溶解後，取1mL加到100片滅菌好的紙片上，放入4℃冰箱，待其充分吸收後（一般要4－8小時），平鋪於(yú)平皿上，在37℃溫箱中充分烘幹，幹燥後立即封裝於(yú)滅菌的小瓶内，密閉保存。

　　二、使用方法：

　　培養基的制備(bèi)：用托盤天平稱(chēng)取營養瓊脂4克，加入潔淨的容器内，再用量筒加入200mL蒸餾水，121℃，滅菌20分鍾
。滅菌後，冷卻至50－60℃，在超淨台内，迅速将培養基倒入滅菌的培養皿内，每個平皿15mL左右，輕搖平皿
，使培養基分布均勻。待其冷卻凝固後，即可使用。

　　谷酰胺脫掉基後，可作爲培養細胞的能量來源，參(cān)與蛋白質的合成和能量代謝。在缺少谷酰胺時，細胞生長(zhǎng)不良而死亡。所以，各種培養液中都含有較大量的谷酰胺。谷酰胺在溶液中很不穩定，應置-20℃冰凍保存，用前加入培養基中。加有谷酰胺的液體培養基4度冰箱儲存兩周以上時，應重新加入原來量的谷酰胺。

　　CoriellInstitute細胞試驗操作中常配制高濃度(100倍)的谷酰胺溶液(1ml/支)，分裝使用，-20℃保存。使用時，每支1ml的谷酰胺加入到99ml*培養基中，使其濃度爲2mM培養基。