teknova培養基是用來供給細胞營養,促使細胞增殖的,也是細胞賴以生長的環境。細胞培養實驗中用量比較多的就是細胞培養基,雖然細胞培養試驗基本技術大同小異,但是每種細胞的培養條件卻相差甚遠。若偏離某種細胞所需的培養條件,則會導緻細胞表達不同的表型。
常見的培養基添加因子
1、青黴素-鏈(liàn)黴素(雙抗生素):用於(yú)預防細胞污染
2、胰島素:作爲細胞培養的添加劑,可促進細胞增殖、延長(zhǎng)細胞壽命,增加蛋白和核酸的表達(dá)量。
3、胰島(dǎo)素-轉鐵蛋白-硒添加劑(ITS):可降低多種細胞常規(guī)維持和低密度貼壁培養時所需的胎牛血清濃度。
4、地塞米松:一種抗炎糖皮質素,對細胞存活、細胞信号傳(chuán)導和基因表達具有一系列的影響。用於(yú)研究細胞凋亡、細胞信号傳(chuán)導通路和基因表達。
5、氫化可的松:促進表皮上皮細胞和乳腺上皮細胞增殖生長(zhǎng),提高神經膠(jiāo)質細胞和成纖維細胞的克隆形成率。
6、白細胞介素2(IL-2):IL-2作爲T細胞生長因子,可增強NK細胞的細胞溶解活性,並(bìng)促進B細胞産生免疫球蛋白。常用於(yú)NK92細胞的培養。
常見的問題
1、培養基使用效果不佳:應定期確(què)認teknova培養基有效期,並(bìng)確(què)認是否使用細胞相應的培養基,培養基使用不當會影響細胞狀态。例如,293T需用高糖DMEM培養,而THP-1則需要用RPMI1640培養!
2、培養基使用時應儲存於(yú)4ºC並(bìng)分裝,避免反複升溫加速谷氨酰胺的降解。
3、不同培養基由於(yú)成分不同,顔色也不盡相同,例如DMEM呈鮮紅(hóng)色,而MEM呈粉紅(hóng)色。
4、細胞培養過程中,可根據細胞培養基顔色變(biàn)化,對培養狀态進行分析,當teknova培養基變(biàn)橙色甚至黃色時,說明細胞代謝産生瞭(le)大量酸性物質,需及時更換新鮮的完全培養基。
5、培養基開封,或者培養皿/瓶從培養箱中取出時,由於(yú)和空氣發生氣體交換,顔色會變(biàn)爲紫紅色,放到CO₂培養箱中即可恢複pH值,顔色變(biàn)爲正常的鮮紅色。